Produse

Hiperpermeabilitatea vasculară contribuie la morbiditatea în inflamație.Metodologiile actuale pentru evaluarea in vivo a permeabilității bazate pe extravazarea albuminei legate de Evans Blue (EB) sunt greoaie și adesea lipsite de sensibilitate.Am dezvoltat o nouă metodologie de fluorescență în infraroșu (IRF) pentru măsurarea extravazării EB-albuminei pentru a cuantifica permeabilitatea vasculară în modelele murine.Permeabilitatea vasculară indusă de endotoxemie a fost examinată pentru toate organele solide, creier, piele și peritoneu prin IRF și măsurarea tradițională bazată pe absorbanță a EB în extractele de țesut.IRF de organ a crescut liniar cu creșterea concentrațiilor de EB intravenos (2,5-25 mg/kg).IRF țesut a fost mai sensibil la acumularea de EB în comparație cu metoda bazată pe absorbanță.În consecință, diferențele în permeabilitatea vasculară și acumularea de organe EB între șoarecii tratați cu lipopolizaharide și tratați cu soluție salină au fost adesea semnificative atunci când au fost analizate prin detectarea bazată pe IRF, dar nu prin detectarea bazată pe absorbanță.EB a fost detectat în toate cele 353 de organe analizate cu IRF, dar numai în 67% (239/353) dintre organele analizate prin metodologia bazată pe absorbanță, demonstrând o sensibilitate îmbunătățită a detectării EB în organele cu IRF.În contrast, EB în plasmă după administrarea EB a fost ușor măsurat prin ambele metode, cu o corelație ridicată între cele două metode (n=116, r2=0,86).Cuantificarea diferențelor EB-IRF specifice organului datorate endotoxinei a fost optimă atunci când IRF a fost comparat între șoareci potriviți pentru greutate, sex și vârstă și cu corecții adecvate pentru greutatea organului și concentrațiile plasmatice EB.În special, metodologia EB-IRF lasă organele intacte pentru histopatologie ulterioară.În rezumat, EB-IRF este o metodă nouă, foarte sensibilă, rapidă și convenabilă pentru cuantificarea relativă a EB în organele intacte de tratament față de șoarecii de control.