Produse

Am dezvoltat un nou sistem de livrare a ARN interferent mic (siRNA) folosind un complex ternar cu polietilenimină (PEI) și acid y-poliglutamic (γ-PGA), care a arătat efect de tăcere și nicio citotoxicitate.Complecșii binari de ARNsi cu PEI au fost de aproximativ 73-102 nm în dimensiunea particulei și 45-52 mV în potențial ζ.Efectul de tăcere al complexelor siRNA/PEI a crescut odată cu creșterea PEI, iar complexele siRNA/PEI cu un raport de încărcare mai mare de 16 au arătat o reducere semnificativă a luciferazei într-o linie celulară de carcinom de colon de șoarece care exprimă în mod regulat luciferaza (celule Colon26/Luc).Cu toate acestea, au fost observate citotoxicitate puternică și aglutinare a sângelui în complexul siRNA/Lipofectamină și complexul siRNA/PEI16.Reîncărcarea complecșilor cationici cu un compus anionic a fost raportată a fi o metodă promițătoare pentru depășirea acestor toxicități.Prin urmare, am pregătit complexe ternare de ARNsi cu PEI (raportul de încărcare 16) prin adăugarea de γ-PGA pentru a reduce citotoxicitatea și a furniza ARNsi.După cum era de așteptat, citotoxicitatea complexelor ternare a scăzut odată cu creșterea conținutului de γ-PGA, ceea ce a scăzut potențialul ζ al complexelor.Un efect puternic de tăcere comparabil cu complexul siARN/Lipofectamină a fost descoperit în complecșii ternari, inclusiv γ-PGA cu o sarcină de suprafață anioică.Încorporarea ridicată a complexelor ternare în celulele Colon26/Luc a fost confirmată cu microcopie de fluorescență.După ce s-a realizat distrugerea unei gene transfectate exogen, a fost evaluată capacitatea complexului de a media distrugerea unei gene endogene de întreținere, gliceraldehida 3-fosfat dehidrogenază (GAPDH), în celulele B16-F10.Complexul ternar (complexul siRNA/PEI16/γ-PGA12) a prezentat un efect semnificativ de deprimare a GAPDH.Astfel, am dezvoltat un sistem util de livrare siRNA.