ONPG CAS:369-07-3 98,0% pulbere min. alb până la aproape alb
Număr de catalog | XD90006 |
CAS | 369-07-3 |
numele produsului | ONPG (2-nitrofenil-beta-D-galactopiranozid) |
Formulă moleculară | C12H15NO8 |
Greutate moleculară | 301,25 |
Detalii de depozitare | 2 până la 8 °C |
Cod tarifar armonizat | 29400000 |
Specificatiile produsului
Puritate (HPLC) | Min.98,0% |
Aspect | Pulbere albă până la aproape albă |
Soluţie(1% în apă) | Soluție limpede, incoloră până la ușor galbenă |
Continut de apa(Karl Fisher) | Max.0,5% |
Rotație optică specifică [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0 ° C până la -73,0 ° C |
Discuții despre testul ONPG (testul β-galactozidazei)
Au fost ridicate frecvent întrebări recent: 1. De ce poate fi folosit testul ONPG pentru a distinge fermentația întârziată a lactozei?2. De ce standardul național prevede că este necesar să se folosească fier trizaharidic de clorură de sodiu 3% (sau fier trizaharid) pentru testul ONPG?3. Pentru Vibrio parahaemolyticus, atunci când se efectuează testul OPNG, de ce ar trebui adăugat toluen în picături conform standardului?Care este funcția?
Compania noastră a analizat o mulțime de informații, le-a rezumat și vi le-a partajat mai jos:
Principiu: Denumirea chinezească a ONPG este o-nitrobenzen-β-D-galactopiranozid.ONPG poate fi hidrolizat în galactoză și o-nitrofenol galben (ONP) de către β-galactozidază, astfel încât activitatea β-galactozidazei poate fi detectată prin schimbarea culorii mediului de cultură.
Lactoza este un zahăr pe care majoritatea microorganismelor trebuie să-l detecteze.Metabolismul său necesită două enzime, una este permeaza celulară, lactoza pătrunde în celule sub acțiunea permeazei;celălalt este β-galactozidaza, care hidrolizează lactoza în galactoză.Lactoza si glucoza.β-galactozidaza poate acționa direct asupra ONPG pentru a-l hidroliza în galactoză și o-nitrofenol galben (ONP).Se poate face in 24h, chiar si cu fermentatoare intarziate cu lactoza.Prin urmare, explică rezultatele observării recoltării culturii 1 din agar-agar și inoculării acesteia într-un cerc complet la 36°C timp de 1-3h și 24h.Dacă se produce β-galactozidază, aceasta se va îngălbeni în 1-3h, dacă nu există o astfel de enzimă, nu își va schimba culoarea în 24h.
Conform celor două enzime de mai sus, microorganismele pot fi împărțite în următoarele categorii:
1 bacterie fermentatoare de lactoză (18-24 ore) cu permează și β-galactozidază P + G +;
2 Fermentatoare de lactoză întârziate (care durează mai mult de 24 de ore) lipsite de permează, dar care posedă galactozidază: P-G+.
3 Fermentatori fără lactoză, fără permează și galactozidază: P-G-.
Testul ONPG poate fi utilizat pentru a distinge bacteriile cu lactoză-lag-fermenting (P-G+) de bacteriile nefermentante cu lactoză (PG-), cum ar fi:
1 Diferențiați fermentatorii tardivi de lactoză (P-G+) de fermentatorii fără lactoză (P-G-).
(a) Citrobacter (+) și Salmonella arizonae (+) din Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) de la Shigella sonnei (-).
De ce a fost efectuat testul ONPG folosind o cultură peste noapte pe trizaharidă ferică de clorură de sodiu 3% (trizaharidă de fier)?Compania noastră a consultat o mulțime de informații, dar nu există o declarație clară.Doar pe site-ul FDA, este scris că „Inoculați culturile care urmează să fie testate pe agar agar înclinat cu trei zahăr și incubați timp de 18 ore la 37°C (sau altă temperatură adecvată, dacă este necesar). Se poate folosi și % lactoză.”înseamnă: bacteriile de testat au fost inoculate pe mediu de fier trizaharid și cultivate la 37°C timp de 18 ore.Sunt acceptate, de asemenea, medii de agar nutritiv (sau alt mediu) care conțin 1% lactoză.Prin urmare, se deduce că mediul de fier trizaharid conține lactoză.După creșterea peste noapte, bacteriile au produs o β-galactozidază activă bună.Folosind astfel de bacterii, ONPG poate fi descompus de β-galactozidază mai rapid.Fenomenul experimental este mai rapid și mai bine manifestat.În plus, adăugarea în picături de toluen și o baie de apă timp de 5 minute sunt toate pentru a elibera complet p-galactozidaza.