Produse

Prezentul studiu descrie o metodă simplă și eficientă care utilizează cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC) cuplată cu detectarea fluorescenței pentru determinarea parametrilor cinetici ai absorbției glutamatului în țesutul nervos.Țesutul retinian obținut de la pui de 7 zile a fost incubat cu concentrații cunoscute de glutamat (50-2000 μM) timp de 10 minute și au fost măsurate nivelurile neurotransmițătorului derivat din o-ftaldehidă (OPA) în mediul de incubație.Prin evaluarea diferenței dintre concentrațiile inițiale și finale de glutamat în mediu, a fost caracterizat un mecanism de absorbție saturabil (K(m)=8,2 și V(max)=9,8 nmol/mg proteină/min).Această măsură a fost în mare măsură dependentă de sodiu și temperatură, susținând cu tărie faptul că mecanismul pentru scăderea concentrației este într-adevăr preluat de transportorii cu afinitate ridicată.În plus, rezultatele noastre au demonstrat, de asemenea, că clorura de zinc (un inhibitor al transportatorilor de glutamat/aspartat) a evocat o scădere dependentă de concentrație a absorbției de glutamă, demonstrând specificitatea metodologiei noastre.În general, lucrarea de față caracterizează o metodologie alternativă pentru a evalua absorbția glutamatului în țesutul nervos folosind HPLC.Această abordare ar putea fi un instrument important pentru studiile asociate cu caracterizarea modificărilor minuscule ale transportului glutamatului legate de leziuni ale sistemului nervos central.