Produse

Efectele detergenților asupra activității P-glicoproteinei atpazei: diferențe în perturbările activităților bazale și dependente de verapamil.

P-glicoproteina (P-gp), o glicoproteină din membrană plasmatică asociată cu fenotipul de rezistență la mai multe medicamente, este responsabilă pentru efluxul dependent de ATP al diferitelor medicamente amfifile.Folosind vezicule membranare preparate din linia celulară multirezistentă DC-3F/ADX, am studiat perturbarea activităților P-gp ATPazei bazale (adică în absența medicamentului) și dependente de verapamil induse de diverși detergenți, la nesolubilizare, precum si la concentratii de solubilizare.Solubilizarea progresivă a membranei cu creșterea concentrației de detergent a fost monitorizată prin experimente de împrăștiere a luminii și centrifugare.Pentru concentrațiile de detergent nesolubilizanți, toți detergenții testați, cu excepția DOC, au indus o inhibare parțială a activității P-gp ATPazei, care nu a fost corelată cu cantitatea diferiților detergenți testați încorporați în membrane.Analiza activării P-gp indusă de verapamil arată că activitatea ATPazei P-gp este modulată diferit de diferiții detergenți la concentrații nesolubilizante.Astfel, interacțiunile specifice dintre P-gp și detergenți sunt mai probabil să apară, mai degrabă decât o perturbare globală a membranei.După solubilizarea de către diferiți detergenți testați, activitatea bazală a P-gp ATPazei a fost practic complet inhibată, cu excepția prezenței CHAPS care a fost capabil să păstreze această activitate la un nivel comparabil cu cel măsurat în membranele native.Cu toate acestea, activarea ATPazei P-gp indusă de verapamil a fost pierdută în timpul solubilizării P-gp de către CHAPS, dar s-a recuperat după diluarea CHAPS sub concentrația sa micelară critică.Aceste observații indică interacțiuni specifice între moleculele P-gp și CHAPS din miceliile mixte.În ansamblu, datele noastre care evidențiază interacțiuni specifice P-gp/detergenți sunt în concordanță cu locația siturilor de transport de droguri pe domeniile transmembranare P-gp.