Produse

Peste 70% dintre glioamele de grad scăzut poartă o mutație heterozigotă R132H în gena care codifică izocitrat dehidrogenaza 1 (IDH1).Acest lucru conferă enzimei noua capacitate de a converti α-cetoglutaratul în 2-hidroxiglutarat, conducând în cele din urmă la tumorigeneză.Sursa majoră de producție de 2-hidroxiglutarat este glutamina, care, în cancer, este, de asemenea, o sursă pentru anapleroza ciclului acidului tricarboxilic (TCA).O sursă alternativă de anapleroză este fluxul de piruvat prin piruvat carboxilază (PC), care este o cale comună în astrocitele normale.Scopul acestui studiu a fost de a determina dacă PC servește ca sursă de anapleroză TCA în celulele mutante IDH1 în care glutamina este utilizată pentru producția de 2-hidroxiglutarat. Au fost investigate astrocitele umane normale imortalizate, concepute pentru a exprima IDH1 mutant heterozigot sau IDH1 de tip sălbatic.Fluxul de piruvat prin PC și prin piruvat dehidrogenază (PDH) a fost determinat prin utilizarea spectroscopiei de rezonanță magnetică pentru a testa marcarea glutamatului și glutaminei derivate din [2-¹³C]glucoză cu etichetă ¹³C.Testele de activitate, RT-PCR și Western blotting au fost utilizate pentru a testa expresia și activitatea enzimelor relevante.Datele din Atlasul genomului cancerului (TCGA) au fost analizate pentru a evalua expresia enzimelor în probele de gliom uman. În comparație cu celulele de tip sălbatic, celulele IDH1 mutante au crescut semnificativ fluxul fracțional prin PC.Acest lucru a fost asociat cu o creștere semnificativă a activității și expresiei PC.Concomitent, activitatea PDH a scăzut semnificativ, probabil mediată de o creștere semnificativă a fosforilării inhibitorii PDH de către PDH kinaza 3. În concordanță cu observația din celule, analiza datelor TCGA a indicat o creștere semnificativă a expresiei PC în probele de gliom uman care exprimă IDH mutant, comparativ cu cele sălbatice. tip IDH. Descoperirile noastre sugerează că modificările PC și PDH pot fi o parte importantă a adaptării celulare la mutația IDH1 și pot servi ca potențiale ținte terapeutice.