Produse

1. Metodele de profilare a metaboliților sunt instrumente importante pentru măsurarea pool-urilor de metaboliți în sistemele biologice.În timp ce majoritatea metodelor de profilare a metaboliților raportează intensități relative sau depind de câteva standarde interne reprezentând toți metaboliții, cerința finală pentru o descriere cantitativă a pool-ului de metaboliți din celulele și fluidele biologice este determinarea concentrației absolute.Raportăm aici o metodă de profilare a metaboliților țintită de cromatografie gazoasă/spectrometrie de masă tandem (GC/MS/MS) sensibilă și de mare capacitate, care permite cuantificarea absolută a tuturor metaboliților detectați.Metoda se bazează pe derivatizarea și cuantificarea cloroformiatului de metil prin adăugarea probelor cu standarde de metaboliți derivatizate separat cu reactivi de derivatizare deuterati.Ionizarea tradițională cu impact de electroni este înlocuită cu ionizarea chimică pozitivă, deoarece aceasta din urmă păstrează într-o măsură mult mai mare ionul molecular și alte fragmente cu greutate moleculară mare.Acest lucru a făcut mai ușor de selectat tranziții MS/MS unice dintre mulți metaboliți coeluați.În prezent, noua metodă GC/MS/MS cuprinde 67 de metaboliți primari comuni, dintre care majoritatea aparțin grupelor de acizi organici amino și nonamino.Arătăm aplicabilitatea metodei pe probe de urină și ser.Metoda este o îmbunătățire semnificativă a metodologiei prezente pentru profilarea cantitativă a metaboliților GC/MS a aminoacizilor și a acizilor organici nonamino.

2.24S-Hidroxicolesterolul (24OHC) și 27-hidroxicolesterolul (27OHC) sunt doi oxisteroli similari din punct de vedere structural de origini diferite - primii formați aproape exclusiv în creier, iar cei din urmă formați într-o măsură mai mică în creier decât în ​​majoritatea celorlalte organe.IPOTEZA DE TESTATE: Leziunile neuronale și/sau demielinizarea determină un flux crescut de 24OHC din creier în lichidul cefalorahidian (LCR), în timp ce o barieră hemato-encefalică defectă determină un flux crescut de 27OHC din circulație în LCR. Diluție izotopică-masă spectrometria a fost utilizată pentru a analiza cei doi oxisteroli din LCR și plasma de la peste 250 de pacienți cu diferite boli neurologice și geriatrice. Nivelurile LCR ale celor doi oxisteroli au fost mult mai afectate de diferite boli decât nivelurile plasmatice.Pacienții cu boli demielinizante active au avut niveluri crescute de 24OHC în LCR cu un raport 24OHC/27OHC relativ ridicat.Pacienții cu meningită în general au avut niveluri ridicate ale ambilor steroizi, cu un raport scăzut 24OHC/27OHC.Pacienții cu boala Alzheimer au avut niveluri ușor crescute de 24OHC în LCR, cu o creștere mai mică a 27OHC.Pacienții cu scleroză multiplă au avut tendința de a avea niveluri mai mari de 24OHC în perioadele active cu un raport ridicat 24OHC/27OHC. Măsurătorile celor doi oxisteroli din LCR și plasmă pot adăuga semnificativ metodelor biochimice existente pentru evaluarea bolilor neurologice.