Produse

CTP:fosfocolin citidililtransferaza α (CCTα) este o enzimă nucleară care catalizează etapa de limitare a vitezei în calea CDP-colinei pentru sinteza fosfatidilcolinei (PC).Activarea lipidică a CCTα are ca rezultat translocarea acestuia în învelișul nuclear și extinderea unei rețele membranare intranucleare numită reticul nucleoplasmatic (NR) printr-un mecanism care implică deformarea membranei.Laminele nucleare sunt, de asemenea, necesare pentru stabilitatea și proliferarea NR, dar nu se știe dacă această structură unică, sau lamina nucleară în general, este necesară pentru sinteza PC.Pentru a examina această relație, lamina nucleară a fost epuizată de ARNi sau perturbată de exprimarea laminei A mutante a sindromului Hutchinson-Gilford progeria (HGPS) (progerina) și a fost analizat efectul asupra metabolismului CCTα și colină.Reducerea la tăcere mediată de siRNA a laminei A/C sau a laminei B1 în celulele CHO pentru a diminua NR nu a avut niciun efect asupra sintezei PC, în timp ce dublul knockdown a inhibat nespecific calea.Confirmând rolul său minor în sinteza PC, doar 10% din fosfotransferaza colină/etanolamină supraexprimată tranzitoriu a fost detectată în NR.În celulele CHO, CCTα a fost nucleoplasmatic și co-localizat cu GFP-progerin în pliuri nucleare și invaginări;cu toate acestea, fibroblastele HGPS au prezentat o distribuție anormală a CCTα în citoplasmă și învelișul nuclear, care a fost însoțită de o reducere de două ori a sintezei PC.În ciuda localizării modificate, experimentele de marcare a colinei au arătat că activitatea CCT nu a fost afectată, iar inhibarea sintezei PC a fost urmărită la o activitate redusă a unui transportor de colină sensibil la hemicoliniu.Concluzionăm că CCTα și laminele cooperează în mod specific pentru a forma NR, dar structura generală a anvelopei nucleare are un impact minim asupra activității CCT și sintezei PC.